细胞培养是从植物或动物中去除细胞,并在受控条件下在人工环境中培养以进行生物学研究。它是了解生理过程、潜在疾病机制、药物和有毒化合物的作用以及药物筛选和开发的宝贵工具。细胞培养也用于疫苗研究、蛋白质治疗和癌症研究。这是一个细致的过程,需要大量的勤奋、技能和经验。
细胞培养过程和程序
细胞培养的过程和程序取决于细胞类型和应用。有两种获得细胞的技术,从细胞库或从组织中分离细胞。
来自细胞库
从细胞库获得的细胞所遵循的细胞培养程序包括:
解冻——冷冻保存的细胞在 37°C 水浴或融化装置中解冻。在冰几乎融化之前,加入培养基稀释冷冻保护液,使细胞沉淀。去除上清液,加入预热至 37°C 的新鲜培养基。然后使用移液管重新悬浮细胞。
细胞接种——通过测量细胞数量并相应地稀释细胞悬液来实现所需的细胞接种密度。
细胞观察——细胞接种后,用光学显微镜观察细胞在容器中,检查活细胞,细胞在容器中分布均匀,有无异物,检查细胞形态。然后将细胞培养容器置于 37°C 的加湿 CO2 培养箱中开始培养。
来自供体组织
当从组织中获得细胞时,遵循的程序是:
细胞分离——使用两种方法从组织中分离细胞,外植体培养和酶法。在酶法中,使用蛋白水解酶溶液,然后将其稀释,然后进行细胞接种和细胞观察步骤以制备细胞培养物。
本应用所需的基本设备和试剂
细胞培养中使用了多种设备和试剂,包括:
层流、培养箱、移液管、滴定管、瓶顶分配器、倒置显微镜、水浴、离心机、细胞培养容器、耗材等等。
试剂是完全培养基、缓冲溶液、分离剂、冷冻保护剂和蒸馏水。
在细胞培养中使用液体处理仪器的好处
细胞培养涉及细致的液体处理,如果操作不当,这可能是一个令人厌烦且耗时的过程。最轻微的错误都可能导致污染并损坏细胞培养物。液体处理仪器满足先决条件,因为它们旨在提高液体处理精度和精度、提高效率并避免任何污染机会。
细胞培养过程中使用的液体处理仪器是移液器、滴定管和瓶口分液器。血清移液管用于重悬细胞。滴定管用于分配准确量的试剂以分离、缓冲或分离细胞。瓶口分液器用于样品制备过程,以提供方便的试剂分液。它们显着提高了生产力并防止了危险。
结论
液体处理设备的作用在细胞培养中至关重要,因为它们提供了准确度、精密度和方便的样品制备。该设备可最大程度地减少污染,减少样品产量的不一致性,并有助于制备均匀的数量。
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